暗视野显微镜的原理是利用丁达尔光学效应的原理,在普通光学显微镜的结构基础上改造而成的。暗视野聚光器,使光源的中央光束被阻挡。不能由下而上地通过标本进入物镜。从而使光改变途径,倾斜地照射在观察的标本上,标本遇光发生反射或散射,散射的光线投入物镜内, 因而整个视野是黑暗的。而具体的原理如下:
丁达尔效应是指当一束光线透过黑暗的房间,从垂直于入射光的方向可以观察到空气里出现的一条光亮的灰尘“通路”,这就是所谓的丁达尔效应。而暗视野显微镜就是利用此原理,在普通的光学显微镜上换装暗视野聚光镜后,由于该聚光器内部抛物面结构的遮挡,照射在待检物体表面的光线不能直接进入物镜和目镜,仅散射光能通过,因而暗视野显微镜视野是黑暗的。
因为暗视野显微镜由于不将透明光射入直接观察系统,无物体时,视野暗黑不可能观察到任何物体,而当有物体时,以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。在暗视野观察物体,照明光大部分被折回,由于物体所在的位置结构,厚度不同,光的散射性,折光等都有很大的变化。
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